1校准：取6个500ml锥形瓶，分别加入临用前配制的汞标准溶液0、0.50、1.00、2.50、5.00、10.00ml，加入水至250ml。然后完全按照测定试验的步骤立即对每一种标准溶液进行处理。最后分别以测定的各吸光度减去试剂空白的吸光度后，和对应的汞含量绘制校准曲线。
2消解：将试样或已经稀释成250ml的部分待测试样（其中含汞不超过10μg），放入锥形瓶中，小心地加入10ml硫酸和2.5ml硝酸，每次加后均混合之。加入15ml高锰酸钾溶液，如果不能在15min内维持深紫色，则混合后再加15ml高锰酸钾溶液以使颜色能持久，然后加入8ml过硫酸钾溶液，并在水浴上加热2h，温度控制在95℃。冷却至约40℃。加入盐酸羟胺溶液还原过剩的氧化剂，直至溶液的颜色刚好消失和所有锰的氧化物都溶解为止，开塞放置5～10min。将溶液转移至500ml分液漏斗中，以少量水洗锥形瓶两次，一并移入分液漏斗中。
3萃取和测定：分别向各份消解液加入1ml亚硫酸钠溶液，混匀后，再加入10.0ml双硫腙氯仿溶液，缓缓旋摇并放气，再密塞振摇1min，静置分层。将有机相转入已盛有20ml双硫腙洗脱液的60ml分液漏斗中，振摇1min，静置分层。必要时再重复洗涤1～2次，直至有机相不带绿色。用滤纸吸去分液漏斗放液管内的水珠，塞入少许脱脂棉，将有机相放入20mm比色皿中，在485nm波长下，以氯仿作参比测吸光度。以试份的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得汞含量。
4空白试验：按6.2.1和6.2.2的规定进行空白试验，用水代替试样，并加入与测定时相同体积的试剂。应把采样时加的试剂量考虑在内。当测定在接近检出限的浓度下进行时，必须控制空白试验的吸光度不超过0.01单位。如超过0.01单位，检查所用纯水、试剂和器皿等，换掉含汞量较高的试剂和（或）水并重新配制，或对沾污的器皿重新处理，以确保测定值有意义。
5校核试验：向6.2.1中保留的第2个试份（D）中加入已知体积的汞标准溶液。如果汞浓度太高，则取用试份的一部分，按6.2.1最后一段及6.2.2的规定，重复进行操作，以确定有无干扰影响。