LabPowerTools
首页 标准解析库 GB/T18204.4-2025
检测方法 AI 结构化解析
GB/T18204.4-2025　公共场所卫生检验方法 第 4 部分: 公共用品用具微生物指标 Examination methods for public places—Part 4: Microorganism indicators on a surface of public articles
发布日期 2025-05-30
实施日期 2025-12-01
替代标准 GB/T 18204.4—2013
解析引擎 v3.4
适用范围 本文件描述了公共场所公共用品用具表面细菌总数、真菌总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌和β-溶血性链球菌的采样与检验方法。本文件适用于公共场所公共用品用具微生物指标的检验，其他场所参照执行。
2 参数限值 6 试验方法 3 计算公式 5 术语 78 约束 3 引用 来源：国家标准全文公开系统
解析版本
AI 问答 术语 限值速查 限值判定 试验方法 计算公式 约束条件 引用标准 能力表述 质检复核
细菌总数3.1
在营养琼脂培养基上经 36 ℃±1 ℃ 培养 48 h 所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。
大肠菌群3.2
在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
金黄色葡萄球菌3.3
在 Baird-Parker 平板上生长良好，在血平板上可形成完全透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性的革兰氏阳性球菌，常呈葡萄球状排列。
真菌总数3.4
在沙氏琼脂培养基上经 28 ℃±1 ℃、3 d～5 d 培养所形成的菌落数。
β-溶血性链球菌3.5
能产生溶血素，血平板上在菌落周围形成界限分明、完全透明的溶血环(β-型溶血)的化脓(或A群)链球菌和无乳(或B群)链球菌。
真菌总数
公共用品用具—CFU/50 cm²7.7.1
β-溶血性链球菌
公共用品用具—8.5
检测结果限值判定（演示）
检测项目
测定结果
判定逻辑：测定结果与限值直接比对（未含测量不确定度保护带），正式报告请按 ILAC-G8 / 标准原文复核。
就这本标准问我
回答基于本标准的结构化解析与条款文本检索生成，附条款溯源；AI 解读请以标准正式原文为准。
看完方法，直接落成原始记录：自动带出检测要求与质控核查项，录读数自动计算判定，可导出活公式 Excel
细菌总数检验方法4
在公共用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，样品经过处理后，在营养琼脂培养基上经36℃±1℃培养48h得到细菌菌落数的测定方法。
仪器 16 项试剂 2 项步骤 5 步
仪器设备
高压蒸汽灭菌器干热灭菌箱恒温培养箱（36℃±1℃）恒温水浴箱（46℃±1℃）冰箱（2℃～5℃）电炉或微波炉天平（感量0.1g）涡旋混合器放大镜或(和)菌落计数器无菌试管（18mm×150mm）无菌平皿（直径90mm）无菌刻度吸管（1mL(0.01mL刻度)）微量移液器（1000μL）灭菌棉拭子灭菌剪刀pH计或精密pH试纸
试剂材料
无菌生理盐水（氯化钠8.5g，纯水1000mL）营养琼脂培养基（蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂20.0g，纯水1000mL，pH7.4±0.2）
分析步骤
1采样方法应符合附录A的要求。
2稀释：将放有采样后棉拭子的生理盐水试管在涡旋混合器上充分振摇，此液为1:10的样品匀液。用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛9mL生理盐水稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。按同法制备10倍系列稀释样品匀液，每递增稀释1次，换用1mL无菌吸管或吸头。
3接种：根据样品污染状况，选择1个～2个适宜稀释度的样品匀液，在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL生理盐水稀释液加入两个无菌平皿作空白对照。
4培养：及时将15mL～20mL冷却至45℃～50℃的营养琼脂培养基（可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，琼脂凝固后，将平皿翻转，36℃±1℃培养48h±2h。
5菌落计数：可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量(CFU)。选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数，低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计，每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。平板内如有链状菌落生长时（菌落之间无明显界限），应将每条链（不同来源）作为一个菌落计。
大肠菌群测定方法5
在公共用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，样品经过处理后，在乳糖胆盐发酵培养液中经36℃±1℃培养检测大肠菌群。
仪器 15 项试剂 4 项步骤 4 步
仪器设备
高压蒸汽灭菌器干热灭菌箱恒温培养箱（36℃±1℃）冰箱（2℃～5℃）电炉或微波炉天平（感量0.1 g）涡旋混合器显微镜无菌接种环（直径3 mm）无菌试管（18 mm×150 mm）无菌平皿（直径90 mm）无菌刻度吸管（10 mL(0.1 mL刻度)）灭菌棉拭子灭菌剪刀pH计或精密pH试纸
试剂材料
乳糖胆盐发酵培养液伊红美蓝琼脂乳糖发酵管革兰氏染色液
分析步骤
1初发酵试验：将放有采样后棉拭子的生理盐水试管在涡旋混合器上充分振摇，此液为1:10的样本匀液。用无菌吸管吸取1:10的样本匀液(多于1 mL)注入双料乳糖胆盐发酵培养液中。置36℃±1℃培养箱内培养24 h±2 h，观察是否产酸、产气，如不产酸、不产气则为大肠菌群阴性。若有产气产酸者，则按c)～e)进行。
2分离培养：自产酸、产气发酵管中取一接种环培养液，划线转种至伊红美蓝琼脂平板上，倒置于36℃±1℃培养箱中培养18 h～24 h，观察菌落形态，典型菌落形态为深紫黑色、具有金属光泽；紫黑色、不带或略带金属光泽；淡紫红色、中心较深。
3挑取伊红美蓝琼脂平板上的典型菌落涂片，进行革兰氏染色镜检。
4挑取c)中典型菌落接种乳糖发酵管，置36℃±1℃培养24 h±2 h，观察是否产酸、产气。
金黄色葡萄球菌测定方法6
采用涂抹法采样，7.5%氯化钠肉汤增菌，Baird-Parker平板或血平板分离培养以及血浆凝固酶试验鉴定的方法测定公共用品用具中的金黄色葡萄球菌。
仪器 17 项试剂 7 项步骤 4 步
仪器设备
高压蒸汽灭菌器恒温培养箱（36℃±1℃）恒温水浴箱（36℃±1℃，50℃±1℃）冰箱（2℃～5℃）电炉或微波炉天平（感量0.1 g）酒精灯生物安全柜离心机显微镜载玻片无菌接种环（直径3 mm）无菌试管（18 mm×150 mm,13 mm×130 mm）无菌平皿（直径90 mm）无菌刻度吸管（1 mL(0.01 mL刻度)、10 mL(0.1 mL刻度)）微量移液器（1000 μL）pH计或精密pH试纸
试剂材料
7.5%氯化钠肉汤Baird-Parker琼脂平板血琼脂平板脑心浸出液肉汤营养琼脂小斜面兔血浆革兰氏染色液
分析步骤
1增菌：将放有采样后棉拭子的生理盐水试管在涡旋混合器上充分振摇，用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1 mL，接种到9 mL 7.5%氯化钠肉汤中，于36℃±1℃培养18 h～24 h。
2分离：取1～2接种环增菌培养物，划线接种至Baird-Parker平板或血平板，Baird-Parker平板于36℃±1℃培养24 h～48 h，血平板于36℃±1℃培养18 h～24 h，观察记录菌落特征。
3革兰氏染色镜检：挑取典型菌落，涂片、革兰氏染色，显微镜下进行观察。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽孢。
4血浆凝固酶试验：挑取Baird-Parker平板或血平板上至少5个可疑菌落(小于5个全选)，分别接种到5 mL脑心浸出液肉汤和营养琼脂小斜面，36℃±1℃培养18 h～24 h。取新鲜配制的兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入脑心浸出液肉汤培养物0.2 mL～0.3 mL，振荡摇匀，置于36℃±1℃培养箱或水浴箱内，每30 min观察一次，在6 h内观察结果。如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块)或凝固体积大于原体积的一半，则判定为阳性结果。同时用已知血浆凝固酶试验阳性和阴性的葡萄球菌标准菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。如结果可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落接种到5 mL脑心浸出液肉汤，于36℃±1℃培养18 h～24 h，重复试验。金黄色葡萄球菌血浆凝固酶试验为阳性。
真菌总数测定方法7
在公共用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，样品经过处理后，在沙氏琼脂培养基上经28℃±1℃、3 d～5 d培养得到真菌菌落数的测定方法。
仪器 11 项试剂 2 项步骤 0 步
仪器设备
高压蒸汽灭菌器恒温培养箱（28℃±1℃）冰箱（2℃～5℃）电炉或微波炉天平（感量0.1 g）涡旋混合器放大镜或(和)菌落计数器无菌试管（18 mm×150 mm）无菌平皿（直径90 mm）无菌刻度吸管（1 mL(0.01 mL刻度)）pH计或精密pH试纸
试剂材料
无菌生理盐水沙氏琼脂培养基
公共用品用具真菌总数检验方法7.4-7.7
仪器 3 项试剂 2 项步骤 6 步
仪器设备
恒温培养箱（28°C ± 1°C）无菌平皿放大镜或菌落计数器
试剂材料
沙氏琼脂培养基无菌稀释液
分析步骤
1采样方法应符合附录 A 的要求。
2稀释: 参照 4.4 b)。
3接种: 根据对样品污染状况的评估, 选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液。在进行10倍递增稀释的同时, 每个稀释度分别吸取1 mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1 mL无菌稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。
4培养: 将溶化并冷却至 45°C 左右的沙氏琼脂培养基倾注平皿约 20 mL～25 mL, 并转动平皿使其混合均匀, 待琼脂凝固后, 倒置平皿于 28°C±1°C 培养箱中培养 5 d, 逐日观察并于第 5 天记录结果。若真菌数量过多可于第 3 天计数结果, 并记录培养时间。
5菌落计数: 可用肉眼观察, 必要时用放大镜或菌落计数器, 记录稀释倍数和相应的菌落数量(CFU)。选择菌落数在 10 CFU～150 CFU 之间的平皿进行计数。
6不同稀释度菌落计数计算规则: 7.6.1 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内, 计算两个平板菌落数的平均值, 再将平均菌落数乘以相应稀释倍数, 作为样本中真菌总数。7.6.2 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时, 应参照 4.6.2 的相关规定进行计算。7.6.3 若所有稀释度的平板上菌落数均大于 150 CFU, 对稀释度最高的平板进行计数, 其他平板可记录为多不可计, 结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。7.6.4 若所有稀释度的平板菌落数均小于 10 CFU, 应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。7.6.5 若所有稀释度平板均无菌落生长, 以小于1乘以最低稀释倍数计算。7.6.6 若所有稀释度的平板菌落数均不在 10 CFU～150 CFU 之间, 其中一部分大于 150 CFU 或小于 10 CFU 时, 则以最接近 10 CFU 或 150 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
β-溶血性链球菌检验方法8.1-8.5
采用涂抹法采样，改良胰蛋白胨大豆肉汤增菌，血琼脂平板分纯培养并使用生化鉴定等方法检测公共用品用具中的β-溶血性链球菌。
仪器 15 项试剂 9 项步骤 7 步
仪器设备
高压蒸汽灭菌器恒温培养箱（36°C ± 1°C）厌氧培养装置冰箱（2°C～5°C）电炉或微波炉天平（感量 0.01 g）显微镜载玻片涡旋混合器微生物生化鉴定系统无菌平皿（直径 90 mm）无菌刻度吸管（1 mL(0.01mL 刻度)、10 mL(0.1 mL 刻度)）微量移液器（1000 μL）无菌锥形瓶（容量 200 mL、500 mL、1000 mL、2000 mL）pH 计或精密 pH 试纸
试剂材料
改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)多黏菌素溶液萘啶酮酸钠溶液哥伦比亚 CNA 血琼脂血琼脂平板革兰氏染色液3%过氧化氢(H2O2)溶液（3%）生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡
分析步骤
1采样方法应符合附录 A 的要求。
2增菌: 将放有采样后棉拭子的生理盐水试管在涡旋混合器上充分振摇, 用无菌吸管或微量移液器吸取液体检样 1 mL, 接种到 9 mL 改良胰蛋白胨大豆肉汤中, 于 36°C±1°C 培养 18 h～24 h。
3分离: 取 1～2 接种环增菌培养物, 划线接种至哥伦比亚 CNA 血琼脂平板, 36°C±1°C 厌氧培养 18 h～24 h, 观察记录菌落特征。β-溶血性链球菌在哥伦比亚 CNA 血琼脂平板上的典型菌落形态为直径约 2 mm～4 mm, 灰白色、半透明、光滑、表面突起、圆形、边缘整齐, 在菌落周围形成完全透明的溶血环, 红细胞完全溶解。
4分纯培养: 挑取哥伦比亚 CNA 血琼脂平板上 5 个(如小于 5 个则全选)典型菌落接种血琼脂平板, 36°C±1°C 培养 18 h～24 h。
5革兰氏染色镜检: 挑取血琼脂平板上典型菌落染色镜检。β-溶血性链球菌为革兰氏染色阳性, 呈球形或卵圆形, 常排列成短链状。
6触酶试验: 挑取血琼脂平板上典型菌落于洁净的载玻片上, 滴加适量 3% 过氧化氢溶液, 于半分钟内有大量气泡产生者为阳性, 不产生气泡者为阴性, β-溶血性链球菌触酶为阴性。
7生化鉴定: 可使用商品化生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡对典型菌落进行鉴定。
公式已就位——生成原始记录后，这些公式将变成 Excel 里的活公式，改读数自动重算重判
菌落总数计算公式4.6.2
N = \dfrac{ΣC}{(n1 + 0.1n2) \cdot d}
计算表达式（可直接用于 Excel/程序）
N = ΣC / ((n1 + 0.1n2) * d)
N样本中菌落总数CFU
ΣC平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和CFU
n1适宜范围菌落数的第一稀释度(低)平板个数
n2适宜范围菌落数的第二稀释度(高)平板个数
d稀释因子(第一稀释度)
细菌总数计算公式4.7.1
A = \dfrac{T × b}{k}
计算表达式（可直接用于 Excel/程序）
A = (T × b) / k
A一定面积的细菌总数测定结果杯具以CFU/cm²为单位报告，其他公共用品用具以CFU/25 cm²为单位报告
T平板平均菌落数CFU
b稀释倍数
k根据采样面积、标准限值单位得出的系数(杯具的系数k为50，其他公共用品用具的系数k为1)
真菌总数计算公式7.7.1
A = \dfrac{T × b}{k}
计算表达式（可直接用于 Excel/程序）
A = (T × b) / k
A一定面积的真菌总数测定结果CFU/50 cm²
T平板平均菌落数CFU
b稀释倍数
k根据采样面积、标准限值单位得出的系数
标准中"施加在执行过程与条件上的要求"（C1 环境 / C4 样品 / C6 质控 / C7 条件限值 / C8 适用范围 / C9 过程参数），是原始记录模板与自动核查的数据源。
C2 · 试验介质/溶液强制纯水 · 水质等级
纯水水质应符合 GB/T 6682 中三级水或以上的要求。试验用水出处：8
C2 · 试验介质/溶液培养基 · pH
7.4±0.2加热溶解后分装前出处：8
C2 · 试验介质/溶液乳糖胆盐发酵培养基 · pH
7.4±None溶解混匀后分装前出处：4.7.6
C2 · 试验介质/溶液乳糖发酵培养基 · pH
7.4±None溶解后分装前出处：4.7.6
C4 · 样品采集/保存强制采样 · 采样方法
a）采样方法应符合附录 A 的要求。样品采集出处：8
C4 · 样品采集/保存卵黄盐水亚碲酸钾混合液 · 保存温度
2 ~ 5 ℃保存于冰箱内出处：4.7.6
C4 · 样品采集/保存允许培养基 · 暂存温度
2 ~ 5 ℃如不及时使用出处：4.7.6
C5 · 设备能力要求恒温培养箱 · 控温精度
28±1 ℃恒温培养箱出处：4.7.6
C5 · 设备能力要求无菌刻度吸管 · 容量与刻度
——无菌刻度吸管:1 mL(0.01 mL 刻度);无菌刻度吸管出处：4.7.6
C5 · 设备能力要求天平 · 感量
≤ 0.01 g天平出处：7.7.6
C5 · 设备能力要求无菌锥形瓶 · 容量规格
——无菌锥形瓶:容量 200 mL、500 mL、1 000 mL、2 000 mL;无菌锥形瓶出处：7.7.6
C6 · 精密度/质控限空白对照 · 空白对照设置
同时分别取1 mL生理盐水稀释液加入两个无菌平皿作空白对照。接种同时出处：8
C6 · 精密度/质控限平板菌落计数 · 适宜计数范围
30 ~ 300 CFU无蔓延菌落生长的平板出处：4.5.1
C6 · 精密度/质控限强制平板菌落计数 · 片状菌落平板处理
其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数其中一个平板有较大片状菌落生长时出处：4.5.2
C6 · 精密度/质控限强制平板菌落计数 · 链状菌落计数
应将每条链(不同来源)作为一个菌落计。平板内如有链状菌落生长时出处：4.5.3
C6 · 精密度/质控限检测结果 · 空白对照有效性
若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。空白对照上有菌落生长出处：4.7.4
C6 · 精密度/质控限空白对照 · 空白对照设置
同时分别取1 mL无菌稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。同时进行出处：4.7.6
C6 · 精密度/质控限空白对照 · 空白对照有菌落生长时的结果判定
若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。空白对照上有菌落生长出处：7.7.4
C7 · 分级/条件限值强制水 · 微生物污染
≤ 1000 CFU/mL水的微生物污染出处：7.7.6
C8 · 适用范围与限制菌落计数结果 · 记录内容
记录稀释倍数和相应的菌落数量(CFU)。肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器出处：8
C8 · 适用范围与限制菌落总数计算 · 单稀释度计算规则
计算两个平板菌落数的平均值，再将平均菌落数乘以相应稀释倍数，作为样本中菌落总数。只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内出处：4.5.4
C8 · 适用范围与限制菌落总数计算 · 双稀释度计算规则
则样本中菌落总数按公式(1)计算，示例见表1。有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时出处：4.6.1
C8 · 适用范围与限制强制菌落总数计算 · 低菌落数计算规则
若所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU，应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU出处：4.6.3
C8 · 适用范围与限制菌落数报告 · 修约规则
菌落数小于 100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。菌落数小于 100 CFU 时出处：4.7.1
C8 · 适用范围与限制菌落数报告 · 修约规则
第 3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前 2 位数字，后面用 0 代替位数菌落数大于或等于 100 CFU 时出处：4.7.2
C8 · 适用范围与限制允许菌落数报告 · 指数形式有效数字
也可用 10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。用 10 的指数形式表示时出处：4.7.3
C8 · 适用范围与限制强制检验方法 · 附录B要求
应符合附录 B 的要求。结果判定出处：4.7.6
C8 · 适用范围与限制允许菌落观察 · 观察方式与记录内容
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量(CFU)。可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器出处：4.7.6
C8 · 适用范围与限制真菌总数计算 · 单稀释度平板菌落数计算规则
若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均菌落数乘以相应稀释倍数，作为样本中真菌总数。只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内出处：7.5.2
C8 · 适用范围与限制强制真菌总数计算 · 两连续稀释度计算规则
若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，应参照 4.6.2 的相关规定进行计算。有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时出处：7.6.1
C8 · 适用范围与限制强制真菌总数计算 · 所有稀释度菌落数均小于10CFU的计算规则
若所有稀释度的平板菌落数均小于 10 CFU，应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。所有稀释度的平板菌落数均小于10 CFU出处：7.6.3
C8 · 适用范围与限制真菌总数计算 · T×b取值规则
若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内,则公式(3)中的 T \times b 值为 4.6.2 中的 N 值。有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内出处：7.7.1
C8 · 适用范围与限制菌落数报告 · 修约规则
菌落数小于 100 CFU 时, 按“四舍五入”原则修约, 以整数报告。菌落数小于100 CFU时出处：7.7.1
C8 · 适用范围与限制菌落数报告 · 修约与有效数字规则
菌落数大于或等于 100 CFU 时, 第 3 位数字采用“四舍五入”原则修约后, 取前 2 位数字, 后面用 0 代替位数菌落数大于或等于100 CFU时出处：7.7.2
C9 · 过程控制参数稀释操作 · 吸管更换
每递增稀释 1 次, 换用 1 mL 无菌吸管或吸头。每递增稀释1次出处：8
C9 · 过程控制参数接种 · 稀释度选择与接种量
选择1个~2个适宜稀释度的样品匀液,每个稀释度分别吸取1 mL样品匀液于2个无菌平皿内。根据样品污染状况出处：8
C9 · 过程控制参数伊红美蓝琼脂 · 冷却温度
50 ~ 55 ℃临用时加入乳糖并加热溶化琼脂后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数革兰氏染色 · 结晶紫染色时间
1±None min涂片火焰固定后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数革兰氏染色 · 碘液作用时间
1±None min滴加革兰氏碘液后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数革兰氏染色 · 脱色时间
30±None s滴加乙醇脱色剂摇动玻片至无紫色脱落出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数革兰氏染色 · 复染时间
1±None min滴加复染液后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数乳糖胆盐发酵培养 · 培养温度与时间
36±1 ℃接种后置培养箱内培养出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数分离培养 · 培养温度与时间
36±1 ℃划线转种至伊红美蓝琼脂平板后倒置培养出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数乳糖发酵管复发酵 · 培养温度与时间
36±1 ℃挑取典型菌落接种乳糖发酵管后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.4±0.2 pH6.3.1.1各成分加热溶解后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基分装 · 每支分装量
9±None mL分装出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基灭菌 · 灭菌温度与时间
121 ℃ 高压灭菌 15 min。分装后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.0±0.2 pH6.3.2.1各成分混合加热煮沸完全溶解后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基分装 · 每瓶分装量
95±None mL分装出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数琼脂培养基 · 冷却温度
50±None ℃临用时加热溶化琼脂后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数增补剂加入量 · 每95mL培养基加入增补剂体积
5±None mL每95mL培养基出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数平皿倾注量 · 每皿倾注培养基体积
15 ~ 20 mL摇匀后立即倾注出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数强制培养基 · 外观状态
培养基应是致密不透明的。培养基制备出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数允许脱纤维羊血制备 · 振摇时间
10±None min无菌操作条件下羊血加入盛有灭菌玻璃珠的容器中出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.5±0.1 pH蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶化于纯水中出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血琼脂平板 · 冷却温度
45±None ℃待冷却后无菌操作加入无菌脱纤维羊血出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血琼脂平板 · 每皿倾注培养基体积
15±None mL摇匀后倾注出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.4±0.2 pH加热溶解后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基分装 · 每支分装量
5±None mL分装出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.3±0.2 pH除琼脂外各成分溶解于纯水并加入15%氢氧化钠溶液约2mL出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数兔血浆制备 · 柠檬酸钠溶液与兔全血配比
取灭菌后 3.8% 柠檬酸钠溶液 1 份，加兔全血 4 份，混匀静置取灭菌后3.8%柠檬酸钠溶液1份加兔全血4份出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数兔血浆制备 · 离心转速与时间
或以 3 000 r/min 离心 30 min，使血细胞下沉，取上层血浆。以3000 r/min离心30 min出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数Baird-Parker平板培养 · 培养温度与时间
Baird-Parker 平板于 36^{\circ}C ± 1^{\circ}C 培养 24 h \sim 48 h , 血平板于 36^{\circ}C ± 1^{\circ}C 培养 18 h \sim 24 h , 观察记录菌落特征Baird-Parker平板出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血平板培养 · 培养温度与时间
血平板于 36^{\circ}C ± 1^{\circ}C 培养 18 h \sim 24 h , 观察记录菌落特征。血平板出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数Baird-Parker平板菌落 · 菌落直径
2 ~ 3 mmBaird-Parker平板上金黄色葡萄球菌菌落出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血平板菌落 · 菌落直径
3 ~ 5 mm血平板上菌落出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数允许血浆凝固酶试验 · 挑取可疑菌落数
≥ 5 个Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落（小于5个全选）出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血浆凝固酶试验 · 培养温度与时间
36^{\circ}C ± 1^{\circ}C 培养 18 h\~24 h。接种到脑心浸出液肉汤和营养琼脂小斜面出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血浆凝固酶试验 · 兔血浆用量
0.5±None mL取新鲜配制的兔血浆放入小试管出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血浆凝固酶试验 · 脑心浸出液肉汤培养物加入量
0.2 ~ 0.3 mL加入兔血浆中出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数血浆凝固酶试验 · 观察间隔与观察时限
每 30 min 观察一次, 在 6 h 内观察结果。置于36℃±1℃培养箱或水浴箱内出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数允许血浆凝固酶试验 · 重复试验培养条件
如结果可疑, 挑取营养琼脂小斜面的菌落接种到 5 mL 脑心浸出液肉汤, 于 36^{\circ}C ± 1^{\circ}C 培养 18 h\~24 h, 重复试验。结果可疑时出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
5.6±0.2 pH蛋白胨、葡萄糖和琼脂溶于纯水加热溶解后出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数样品匀液 · 选择稀释度数量
2 ~ 3 个根据对样品污染状况的评估出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数稀释度样品匀液 · 每稀释度吸取体积与平皿数
每个稀释度分别吸取1 mL样品匀液于2个无菌平皿内。进行10倍递增稀释的同时出处：4.7.6
C9 · 过程控制参数培养基 · pH
7.3±0.2 pH8.3.1.1.1各成分溶于纯水加热溶解后出处：7.7.6
C9 · 过程控制参数多黏菌素B溶液 · 配制浓度
称取 10 mg 多黏菌素 B 于 10 mL 灭菌纯水中，振摇混匀，充分溶解后过滤除菌。称取10 mg多黏菌素B于10 mL灭菌纯水中出处：7.7.6
C9 · 过程控制参数萘啶酮酸溶液 · 配制浓度与溶剂
称取 10 mg 萘啶酮酸于 10 mL 0.05 mol/L 氢氧化钠溶液中，振摇混匀，充分溶解后过滤除菌。称取10 mg萘啶酮酸于10 mL 0.05 mol/L氢氧化钠溶液中出处：7.7.6
GB 4789.28食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求最新版适用规范性引用
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法最新版适用规范性引用
GB 19489实验室 生物安全通用要求最新版适用规范性引用
检测能力（方法标准）认可领域：01 生物 › 0101 食品的微生物检测
序号检测对象项目/参数领域代码检测标准（方法）名称及编号（含年号）说明备注
序号名称
1公共场所卫生1真菌总数010199《公共场所卫生检验方法 第 4 部分: 公共用品用具微生物指标》GB/T18204.4-2025 7.7.1
Examination methods for public places—Part 4: Microorganism indicators on a surface of public articles
22β-溶血性链球菌010199《公共场所卫生检验方法 第 4 部分: 公共用品用具微生物指标》GB/T18204.4-2025 8.5
Examination methods for public places—Part 4: Microorganism indicators on a surface of public articles
共 2 项参数：0 项已自动推荐领域代码，2 项待人工确认。领域代码依据 CNAS-AL06:2024 规则推荐，检测对象依据：标准名称（方法标准主体）；正式申报前请人工核对，「说明」列的限制范围（只测/不测、量程等）按实验室实际填写。
解析模型与复核模型对以下关键数值意见不一。 点击您认可的一侧卡片即可投票，多数人的意见即最终结论；每项仅可投一次，首次投票 +2 LP。 已定案项目会在正文对应位置标注 ⚖，悬停可见两模型的分歧详情。
复核项加载中…
本页内容由 AI 从标准公开文本自动解析生成，条款级溯源（"出处"列）。仅供学习参考，检测判定请以标准正式原文为准。
LabPowerTools · 超级标准
© 2026 LabPowerTools